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分光光度法基本介紹
日期:2025-05-10 11:07
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摘要:
分光光度法基本介紹
分光光度法是基于不同分子結構的物質對電磁輻射的選擇性吸收而建立起來的方法,屬于分子吸收光譜分析。當光通過溶液時,被測物質分子吸收某一波長的單色光,被吸收的光強度與光通過的距離成正比。在波長、溶液和溫度確定的情況下,測得的摩爾消光系數(shù)是由給定物質的特性決定的。
分光光度法是基于不同分子結構的物質對電磁輻射的選擇性吸收而建立起來的方法,屬于分子吸收光譜分析。當光通過溶液時,被測物質分子吸收某一波長的單色光,被吸收的光強度與光通過的距離成正比。在波長、溶液和溫度確定的情況下,測得的摩爾消光系數(shù)是由給定物質的特性決定的。
實際上,分光光度法測得的摩爾消光系數(shù)也和使用的儀器有關。因此,在定量分析中,通常并不用已知物質的摩爾消光系數(shù),而是用一個或多個已知濃度的待測物質作一條校準或工作曲線。摩爾消光系數(shù)的意義是即每升含有一摩爾核酸磷的溶液在260 nm波長處的消光值(即光密度,或稱為光吸收)。其大小反映吸光物質對光的吸收能力,也反映了用吸光度法測定該吸光物質的靈敏度。